721型分光光度計允許的測定波長范圍在360～800nm，其構造比較簡單，測定的靈敏度和精密度較高。因此，應用比較廣泛。
從光源燈發出的連續輻射光線，射到聚光透鏡上，會聚后，再經過平面鏡轉角90°，反射至入射狹縫。由此入射到單色器內，狹縫正好位于球面準直物鏡的焦面上，當入射光線經過準直物鏡反射后，就以一束平行光射向棱鏡。光線進入棱鏡后，進行色散。
色散后回來的光線，再經過準直鏡反射，就會聚在出光狹縫上，再通過聚光鏡后進入比色皿，光線一部分被吸收，透過的光進入光電管，產生相應的光電流，經放大后在微安表上讀出。
721型分光光度計波長的選擇
波長的選擇一般是選擇待測物質最大吸收峰的波長(λmax)。因在λmax測定吸光度，敏感度最高。在吸收峰波長處測吸光度，波長變化影響最小;而在其他波長處，波長變化對吸光度影響大，甚至測得濃度一吸光度曲線不呈直線。
選擇測定某一溶液所需的波長，是可以用不同的波長作該溶液的吸收光譜曲線，從曲線上選擇適當的波長來進行這一溶液的測定工作，但是，在分析工作中，尚有個別情況，不能單憑此一原則，而應根據下列三個原則，進行實際試測，然后全面考慮利弊，再行選定。
1.應使被測溶液有適當的光密度，一般而言，適當的光密度為0.1—0.7，而以0.2—0.6理想。過低的光密度因儀器的讀數誤差而產生很大的相對誤差，反之，過高的光密度則往往已超過直線范圍而引入誤差。
2.應使干擾影響降低至低限度。在反應中，如遇不易去除的干擾色澤，應選用對此干擾色澤最不靈敏的波長。
3.應使標準曲線在盡可能大的范圍內接近直線。
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